DETECÇÃO MOLECULAR DE FUNGOS TOXIGÉNICOS EM PRODUTOS AGRÍCOLAS EM MOÇAMBIQUE

M. Parruque^a; E. Cambaza^b; L. Rodrigues^c; J. Silva^d; T. Magaia^a; R. Abubacar^a; N. Nhamuchue^a e E. Mongo^e

^aUniversidade Eduardo Mondlane (UEM-DCB), Moçambique, Maputo (email: a21001113@ihmt.unl.pt)

^bUnISCED, Moçambique (email: edycambaza@gmail.com)

^cUniversidade Nova de Lisboa (IHMT-NOVA) (email: LRodrigues@ihmt.unl.pt)

^dUniversidade de Brighton (email: J.Inacio@brighton.ac.uk)

^eCISPOC (email: eddsonmongo@gmail.com)

Introdução

As micotoxinas representam um problema sério de saúde pública com cerca de 25% de alimentos contaminados no mundo. Países africanos, como Moçambique, levantam maior preocupação devido a escassez de programas de monitoramento de contaminação de culturas agrícolas, más práticas agrícolas de colheita, armazenamento e processamento. Assim, surge a necessidade de implementação de técnicas de detecção e identificação rápidas e precisas das micotoxinas de modo a monitorar a sua entrada na cadeia alimentar.

Objectivo

Detectar fungos toxigénicos através da técnica de PCR convencional em produtos agrícolas em Moçambique.

Metodologia

As amostras de milho e amendoim foram cultivadas em câmera húmida para desenvolvimento do micélio fúngico, o DNA foi extraído dos micélios usando o kit comercial Qiagen AllPrep Fungal DNA/RNA/Protein purification, seguido pela quantificação em Nanodrop e gel de agarose. A amplificação será realizada por PCR usando os primers universais ITS1 e ITS4. Os produtos da PCR serão quantificados em gel de agarose à 1% no programa Quantity One versão 4.6. e fielmente levados ao sequenciamento de Sanger. Os resultados serão organizados em tabelas Excel versão 16.0. e analisados no programa SPSS versão 22.

Resultados

O DNA extraído apresentou índices de pureza adequados, na faixa de 1,4 à 2,0, o tamanho das bandas de gDNA foi o esperado com cerca de 1kb. Os primers ITS1 e ITS4 eficazes na identificação molecular de fungos com potencial toxigénico comparados às observações microscópicas, podendo apresentar para os fungos filamentosos bandas com cerca de 600pb. São normalmente usados na confirmação da presença das espécies potencialmente toxigénicas como Aspergillus flavus, Penicillium sp., Aspergillus niger e Aspergillus parasiticus.

Conclusões

A identificação molecular de fungos com potencial toxigénico, supera as limitações dos métodos morfológicos e contribui para um diagnóstico mais confiável podendo influenciar de forma eficaz aos decisores na elaboração de políticas de controlo mais eficazes.

Palavras-chave: Micotoxinas, Fungos, PCR.